木瓜為薔薇科木瓜屬植物，用途（tú）廣泛，集觀賞、食用、藥用（yòng）於一體。木瓜在（zài）我（wǒ）國（guó）分布廣泛，醫（yī）學名著《本草（cǎo）綱目》《本草（cǎo）遺（yí）拾》等對木瓜的舒（shū）筋活絡、解渴生津、平肝和胃、去風濕、治霍亂等功效都（dōu）有詳盡的記載。木瓜具有（yǒu）抗肝炎作用（yòng），用於治療腰椎增生性關節炎、前列腺增生、術後疼痛及痹證等症狀。近年來的研（yán）究（jiū）表明，木瓜果實中除含有氨基酸、維生素、果膠（jiāo）、有機酸、礦物質等營養物質外（wài），還含有具有（yǒu）生物活性的黃酮類物質（zhì）。

　　有文獻報道木瓜中總黃酮的提（tí）取方法采用（yòng）乙醇提取，但是，這種（zhǒng）方法（fǎ）的提取（qǔ）效率仍（réng）然（rán）較低。近年來，超（chāo）聲技術應用於提取植物中的生物堿、苷類、生物（wù）活性物質、動物組織漿的毒質等研究已有報道，表明其具有耗能低、效率（lǜ）高、不（bú）破壞有效成分的特點。很多研究表（biǎo）明，利用超聲波（bō）產（chǎn）生的強烈振動、高的加速度（dù）、強烈的空化（huà）效應、攪拌作用等，可（kě）加速植（zhí）物材料中的有效成（chéng）分進入溶（róng）劑，從而增（zēng）加有（yǒu）效成分的提取率，縮短提取時間，並且還可（kě）避免高溫對（duì）提取成分的影響。但超聲技（jì）術應用於提取木瓜葉中黃酮類物質（zhì）的研究尚未見報道，本文（wén）報道用超聲波（bō）提取木瓜葉（yè）總黃酮及鑒（jiàn）別。

1　儀（yí）器與試劑

1.1　儀器　JP600G型超聲波提取罐（武漢嘉鵬電子有限公司）；UV-755B紫外可見分光光（guāng）度計（上海分析儀（yí）器總廠）； ZF-Ⅰ型三用紫外分析儀（上（shàng）海（hǎi）顧村光電儀器廠）；SHB-Ⅲ循環水式（shì）多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）。

1.2　試劑　95%乙（yǐ）醇（chún）AR; 60%乙醇AR；亞硝酸鈉AR;硝酸鋁 AR；氫氧化鈉AR;正丁醇AR；三氯（lǜ）化鋁AR;鹽酸AR;氨水（shuǐ）AR;鎂（měi）粉AR;乙酸鎂AR;冰醋酸AR;乙酸乙酷AR;蘆丁（dīng）標（biāo）準品（中國藥品生物製品檢定所）；新鮮木瓜葉采自右江民族醫學院校園內（nèi）。

2　方法與結果

2.1　總（zǒng）黃酮成分（fèn）提取　取新鮮木瓜（guā）葉，烘（hōng）幹，粉碎。稱取木瓜葉粉末約6g，加80 ml95 %乙醇，超聲波提取（qǔ）2.5 h，抽濾。濾渣（zhā）再加80 ml95％乙醇，超聲波（bō）提取（qǔ）2.5 h，抽濾，合並兩（liǎng）次濾液，減壓回（huí）收乙醇至濾液僅剩5～7 ml為（wéi）止（zhǐ），放置100ml容量瓶中，用 60%乙醇（chún）稀釋至刻度，得樣品液。

2.2　測定方法依據　以蘆丁為對照品測定木瓜葉中總黃（huáng）酮的含量，加人鋁離子試劑，同時控製適（shì）宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形（xíng）成絡合（hé）物，在可見光區能獲得穩定的特征吸收峰。

2.3　定量實驗-總黃用的含量測定

2.3.1　波長的選（xuǎn）擇　取樣品液適量，在0.30 ml5%亞硝酸（suān）鈉溶液存在的堿性條件下，經硝酸鋁顯色後，以試劑為空白參比液（yè）在420 700 nm波長範圍測定絡合物的（de）吸光度，絡（luò）合物於510 nm波（bō）長處好的吸（xī）收，故測定時選用（yòng）此波長。

2.3.2　標準曲線的繪製　分（fèn）別精密吸取蘆丁對照液（0.10 mg/ ml)0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml於10.00 ml容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30 ml,搖勻（yún），靜置6 min;再加（jiā） 10%硝（xiāo）酸鋁溶液0.30 ml，搖（yáo）勻（yún），靜置6 min;再加4%氫氧化鈉溶（róng）液4.00 ml，用60%乙醇（chún）稀釋（shì）至刻（kè）度，搖（yáo）勻（yún），靜置（zhì）12 min，以（yǐ）試劑作空白參比液，於510 nm處測定吸光度，結果見表1。

表1　紫（zǐ）外可見分光光度計測定蘆丁對照液吸光度

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C/mg·ml-1　 吸（xī）光（guāng）度

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0.00　 0.000

0.005　 0.038

0.01　 0.076

0.02　 0.159

0.03　 0.245

0.04　 0.330

0.05　 0.415

————————————

根據上表得（dé）回歸方程：A＝-6.967 1×10-3＋8.418 1C,r =0.999 9

2.3.3　提取物含量的測定　精密吸取樣品液0.50 ml,置10.00 ml 容量瓶，按標準曲線的製備（bèi）方法測定其吸光度（dù）A＝0.409，根據回歸方程：A＝-6.967 1×10-3+8.418 1C，計算樣品中總黃酮的含量C=0.988 0 mg/ml。

2.3.4　回收實驗　精（jīng）密量取樣品液（yè）1.00 ml，加入標準蘆丁對照品 1.00 ml(0.10 mg/ml），同前樣品測定方法操（cāo）作測定吸（xī）光度，求出回收率為97.79%。

2.4　定性實臉-總黃酮的鑒別（bié）

2.4.1　顏色反應　紫外光下呈色反應：取該樣品溶液點在濾紙上，在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈灰褐色並有熒光（guāng）斑（bān）點。

濃氨水反應：取該樣品溶液點在濾紙上，將濾紙在氨水上方（fāng）熏（xūn）0.5 min，立即在紫外光下觀察，呈很明顯的黃褐（hè）色熒光斑點（diǎn）。

三（sān）氯化鋁（lǚ）反應：取樣品（pǐn）溶液點在濾紙上，滴加1%三氯（lǜ）化鋁乙醇溶液，吹（chuī）幹。在可見光下呈灰（huī）黃色，在紫外光下呈黃（huáng）色熒光斑點。

乙酸鎂反（fǎn）應：取（qǔ）樣品溶（róng）液點在濾紙上，滴加1%乙（yǐ）酸鎂甲醇（chún）溶液，吹幹，紫外光下呈黃（huáng）色斑點。

鹽酸-鎂粉反（fǎn）應：取乙醇提取液1ml於試管中加鎂粉，再加入（rù）濃鹽酸數滴（1次（cì）加入（rù）），在泡沫處呈紫紅色。

2.4.2　紙層析　取樣品溶液（yè）10μl點在（zài）濾紙上。用正丁（dīng）醇，醋酸（suān） :水=4:1:5（體積比）為展開劑，上行展開5 h,取出晾幹。噴 1%氯化鋁乙醇溶液。吹幹後於紫外光下，可見熒光斑點。

3　討論

3.1　實驗結果表明，本實驗方法工藝簡單，回收率為（wéi）97.79%，利用本文所提供的超聲波提取、純化方法而得到的黃酮類物質其純度較（jiào）高（gāo）。超聲（shēng）波可以強化（huà）乙（yǐ）醇浸提法，達到省時、節能的（de）目的，此方（fāng）法采用全物理過程，無任何汙染，是一（yī）條理想的提取黃酮（tóng）類物質的途徑，具有廣闊的應用前景。

3.2　黃酮類化合物是一大類天然產物，廣泛存在於（yú）植物界，是許多中草藥的有（yǒu）效成分。在自然界中很常見的是黃（huáng）酮（tóng）和黃酮醇，其它包括雙氫黃（醇）、異黃酮、雙黃酮、黃烷（wán）醇、查爾（ěr）酮、橙酮、花色昔及新黃酮類等（děng）。天然來源的生物黃酮（tóng）分子量（liàng）小，能被人體迅（xùn）速吸收，能通過血腦屏障，能進入脂肪組織，進而體現出如下功能:消除疲勞（láo）、保護血管、防動脈（mò）硬化、擴張毛細血管（guǎn）、疏通微循環、抗脂肪氧化（huà）、抗衰老（lǎo）、活化大腦及其他髒器細胞的功能。

　　黃酮類化合物具有抗癌、抗腫瘤、抗心腦血管疾病、抗炎鎮痛、免疫（yì）調節、降血糖、治療骨（gǔ）質（zhì）疏鬆、抑菌抗病毒、抗（kàng）氧化、抗衰老、抗輻射等作用。近年來，世界（jiè）上掀起了植物藥開發的熱潮，植物藥以其天然低毒的特點倍受青睞，而黃酮類化合（hé）物以其廣（guǎng）譜的藥理作用引人（rén）矚目，木瓜葉分布廣泛，本文實驗結果表明，木瓜葉中含有較為（wéi）豐富的黃酮。因此，木瓜葉具有廣泛開（kāi）發和利用價值，值得綜合利用加強資源開發。 （時珍國醫國藥第17卷第10期）

　　產品型號：JP600G型超聲波提取/乳化機組

　　機型結構：超聲波發生（shēng）器與提取罐分體式

　　超聲頻率：28KHz

　　超聲峰值功率：1000W （由原600W升級至1000W，價格不變）

　　提取罐內尺寸：直徑320 ×高250mm

　　提取罐容積：小於等於20L

　　攪（jiǎo）拌電機功率：15W

　　攪拌電機轉速（sù）：10-30轉/min（可調）

　　電加熱功（gōng）率：2KW

　　供電電源：220VAC 50HZ 

　　具有數顯時鍾可調功能

　　具有數顯功率（lǜ）可調功能

　　具有數顯掃（sǎo）頻可（kě）調功（gōng）能

　　具有（yǒu）數顯溫度可調功能

　　武漢嘉鵬電子有限公（gōng）司專業（yè）致力於超聲波提（tí）取/萃取（qǔ）、超聲（shēng）波乳化、超聲波（bō）清洗、超聲波汙水處理（lǐ）、超聲波酒類醇化產品的研發、生產及銷售。公（gōng）司擁有技（jì）術（shù）。其中“數字式大功（gōng）率多用途超聲波電源係統”獲武漢市重大科技成果獎。數字掃（sǎo）頻實現了用戶（hù）迫切需要的變（biàn）頻要求的（de）同時還彌補了早期雙頻或多頻技術帶來的（de）超聲轉（zhuǎn）換效率很低的弊端。此（cǐ）項技術經由全國各大院校的用戶使用後反應很好。應用於植物（wù）提取（qǔ）、乳化、汙水處理等領域，院校包括：清華大學、北京大（dà）學、浙江大學、華中科技大學、武漢（hàn）大學、華中師大、中國地質大學、武漢科技大學、上海交大、浙江（jiāng）工業大學、蘭州大學、河南農業大學、武漢化工學院、吉林大學、四川大學、華（huá）南理工大學、華東理工大學、江漢大學、長江大學、中科院武（wǔ）漢植物所、昆明植物所、中科（kē）院過程所、中科院武漢物理（lǐ）所、武漢市藥檢（jiǎn）所等。公司（sī）產品行銷全國除港、澳、台外的所有省份及直轄市。售後方麵：公司產品使用自主技術故性能穩定、質量很好。公司承諾5年內免費質保。用戶采用超聲波（bō）需注意的事項：超聲波提取方麵：一、被提取物需粉碎到20目或更細。粉碎越細得率越高（gāo）。二、選用合適的提取溶劑。三、根據產品的特性和產量合理的安排提取工藝。

　　超聲（shēng）波乳化方麵：一、乳化液的配方包括乳（rǔ）化劑的用量。二、乳化時間（jiān）的選定，並不是時（shí）間長就越好，乳化（huà）過程是分散和聚合不停的循環的過程。按現有試驗結果顯示10－15分鍾的乳化粒（lì）徑（jìng）可達100納米。

　　重要的是（shì）數字掃（sǎo）頻的選擇（zé），此項共有16檔選擇，數值越低則氣泡越粗、力量越大；數值越（yuè）高則氣泡越細、力（lì）量越小。不同的提取或乳化物質改（gǎi）變（biàn）數字掃頻會帶來不同的效（xiào）果及效率。

　　超聲波提（tí）取（qǔ）天然產物包括超聲波提取多（duō）肽、氨基（jī）酸、核酸（suān）、各種酶類（lèi）、單糖、寡糖、多（duō）糖、糖蛋白（bái）、樹脂、膠體物、木質素、維生素、脂肪、油脂、蠟、生物堿、揮發油、黃酮、糖苷類、苯丙素類、有機酸、酚類、醌類、甾體化合物、抗（kàng）生（shēng）素類等（děng）。